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试述如何应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学的研究，并分析其优缺点。

题目

试述如何应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学的研究，并分析其优缺点。

相似考题

1.下列各项中不属于功能基因组学研究内容的是( )A、蛋白质组学B、鉴定（注释）基因C、转录组学D、描述基因表达模式E、分析基因序列之间的差异与相似性

2.某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带分析（从上至下），与正常叶片相比，实验结果是（）A、光吸收差异显著，色素带缺第2条B、光吸收差异不显著，色素带缺第2条C、光吸收差异显著，色素带缺第3条D、光吸收差异不显著，色素带缺第3条

3.试述香菇代料栽培的工艺流程，并谈谈如何才能获得高产优产。

4.宏观经济学与微观经济学根本的差异在于（）。A、研究对象差异B、分析方法的差异C、政策结论的差异D、研究视角的差异E、研究变量的差异

参考答案和解析
正确答案: 2D-PAGE原理是根据蛋白质的等电点和分子量的差异而使之分别在等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中分离出来。
应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学研究主要步骤有：
1、在应用2D-PAGE研究差异蛋白质组学问题时首先要获得要进行差异比较的组织，如肿瘤组织与癌旁正常组织，然后裂解组织和细胞，抑制蛋白酶活性，出去非蛋白质的DNA，RNA，脂类等物质，溶解蛋白质，溶解并抽提总蛋白质。
2、将准备好的蛋白质进行2D-PAGE实验，先选择合适的PH范围进行等电聚焦，平衡胶条，再进行第二维的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3、对2D凝胶进行染色处理（可选择各种染色方法），利用软件分析比较成对组织的2D结果，找到上调或下调的蛋白质点。
4、将有差异的蛋白质点切割下来进行质谱分析，质谱谱图通过查询数据库找得蛋白质点对应的蛋白质。5、对于得到的有差异的蛋白质要进一步进行验证，常用的手段包括：WesternBlot，RT-PCR，免疫组织化学等。
利用2D－PAGE进行差异蛋白质组学分析的优点主要在于：
1、效率高：目前，一块胶板（16cm×20cm）可检测到3000～4000个甚至10000个蛋白斑点。
2、可重复性好：80年代开始采用固定化pH梯度胶的IEF，克服了载体两性电解质阴极漂移等许多缺点而得以建立非常稳定的可以随意精确设定的pH梯度，可建立很窄的pH范围（0.05U/cm），对特别感兴趣的区域做第二轮分析，大大提高了分辨率。固定化pH梯度胶已有商品生产，基本解决了重复性的问题；
3、灵敏度高：SDS-PAGE有垂直板和水平超薄胶电泳两种方法，可分离10～100kD分子量的蛋白质；银染色法可检测到4ng蛋白，同位素标记法最灵敏，可测定20ppm的标记蛋白。
利用2D－PAGE进行差异蛋白质组学分析的缺点主要在于：
1、对盐，DNA等杂质高度敏感。
2、对于溶解度低的输水性蛋白质，酸性，碱性蛋白质效果不好。
3、对PH和MW的范围有所限制。
4、耗时，无法自动化。
更多“试述如何应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学的研究，并分析其优缺”相关问题

  • 第1题：

    分子营养学的研究方法包括（）

    • A、基因组学方法
    • B、蛋白质组学方法
    • C、表观遗传学研究方法
    • D、生态学研究方法
    • E、基因多态性研究方法

    正确答案:A,B,C,E

  • 第2题：

    什么是蛋白质组学？简述二维电泳（2-DE）和质谱（MS）技术在蛋白质组学研究中的应用。


    正确答案: 蛋白质组学（Proteomics）：指在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质表达水平，翻译后修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
    目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面研究的最为广泛，其分析通常有三个步骤：第一步、运用2-DE技术分离样品中的蛋白质；第二步、应用质谱技术或N末端测序鉴定2-DE分离的蛋白质；第三步、应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。
    （1）2-DE（Two-dimensional gel electrophoresis，双相凝胶电泳）
    2-DE在1975年出现，是一项广泛应用于分离细胞、组织、或其他生物样品中蛋白质混合物的技术。它根据蛋白质不同的特点分两相分离蛋白质。第一相是等电聚焦（IEF.电泳，根据蛋白质等电点的不同进行分离。
    第二相是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE.，根据蛋白质的分子量不同进行分离。经过2-DE以后，二维平面上每一个点一般代表了一种蛋白，这样成千种不同的蛋白即可被分离，有关蛋白质的等电点、分子量及每种蛋白的数量信息也可以得到。
    （2）MS（MassSpectrometry，质谱）
    对2-DE所产生的上千个蛋白用传统的方法如Edman降解法等进行分析将是一个很艰巨的任务。质谱技术的发展解决了这一难题。它需要三个步骤，首先通过离子化装置将分子转化为气态离子，接着通过质谱分析器按照质荷比（m/z）的不同进行分离，最后转化到离子检测装置。

  • 第3题：

    什么是蛋白质组学？其研究内容有哪些？


    正确答案:蛋白质组学是指在特定的时间和特定的空间研究一个完整的生物体（或细胞）所表达的全体蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平、翻译后修饰、蛋白质与蛋白质间的相互作用等，从而在蛋白质水平获得对生物体生理、病理等过程的全面认识。
    其研究内容有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能的确定、寻找药物的靶分子。

  • 第4题：

    蛋白质组学的研究内容包括：（）、（）、（）、（）。


    正确答案:蛋白质鉴定；翻译后修饰；蛋白质功能鉴定；服务与人类的健康

  • 第5题：

    如何运用框架分析进行传播学研究？


    正确答案: 运用框架分析进行传播学研究主要有四种类型：
    一是“框架建构”，即框架是如何被生产出来，通常涉及组织把关、记者专业主义价值以及关于受众的角色期望如何影响新闻的内容与形式；
    二是“框架设置”，更多关注于框架的媒介效果问题；
    三是“框架的个人层面影响”，关注于影响受众行为、态度、认知的变量；
    四则是“作为受众的记者”，即将新闻记者视为受众进而检视他们关于框架的认知。

  • 第6题：

    蛋白质组学研究哪些主要内容？


    正确答案: 蛋白质组学的研究内容不仅包括对各种蛋白质的识别和定量化，还包括确定它们在细胞内外的定位、修饰、相互反应、活性和最终确定它们的功能，如蛋白质与疾病的关联性。随着学科的发展，蛋白质组学的研究内容也在不断完善和扩充。
    目前涉及如下几个方面：
    （1）蛋白质：如蛋白质组作图、蛋白质组成分鉴定、蛋白质差异显示、同工体比较、新型蛋白质发掘和蛋白质组数据库构建等；
    （2）基因：如完善功能基因组计划，可进行基因产物（蛋白质）识别、进一步进行基因功能鉴定、基因调控机制分析；
    （3）重要生命活动的分子机制：包括细胞周期、细胞分化与发育、肿瘤发生与发展、环境反应与调节、物种进化等；
    （4）医药靶分子寻找与分析：靶分子类型包括新型药物靶分子、肿瘤恶性标志，人体病理介导分子、病原菌毒性成分。

  • 第7题：

    简介蛋白质组学及其应用。


    正确答案:蛋白质组学研究的是一个基因组所表达的全套蛋白质，包括一种细胞乃至一种生物在特定的时间和空间上表达的全部蛋白质。近几十年来随着基因组学的不断进展，肿瘤的发病机制得到一定的阐明，诊断和治疗上也取得了重大进展，但对患者的临床处理和预后没有实质影响，究其原因，主要是不能解决早期诊断的问题。蛋白质组学能直接从蛋白质的整体水平动态定量，以考察肿瘤发生过程中蛋白质种类、数量的改变，有助于寻找肿瘤早期诊断和预后的特异性标记物及有效的治疗靶标。蛋白质组学的研究包括蛋白质的定性、检测翻译后修饰、比较疾病不同阶段蛋白质表达差异、研究蛋白质与蛋白质以及蛋白质DNA/RNA之间的相互作用。

  • 第8题：

    蛋白质组学的内容包括（）。

    • A、是后基因组研究的一部分
    • B、研究组织细胞中全部蛋白质表达的情况
    • C、以双向电泳为一重要手段
    • D、是以蛋白质的分类为研究目标
    • E、需要对差异蛋白进行质谱分析

    正确答案:A,B,C,D,E

  • 第9题：

    填空题
    蛋白质组学的研究内容（）、（）、（）、（）。

    正确答案： 蛋白质鉴定,翻译后修饰,蛋白质功能确定,寻找药物的靶分子
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    多选题
    分子营养学的研究方法包括（）
    A

    基因组学方法

    B

    蛋白质组学方法

    C

    表观遗传学研究方法

    D

    生态学研究方法

    E

    基因多态性研究方法


    正确答案： A,B,C,E
    解析： 主要考核分子营养学的研究方法，包括：①基因组学方法；②蛋白质组学方法；③表观遗传学研究方法；④基因多态性的研究方法。

  • 第11题：

    多选题
    蛋白质组学的内容包括（）。
    A

    是后基因组研究的一部分

    B

    研究组织细胞中全部蛋白质表达的情况

    C

    以双向电泳为一重要手段

    D

    是以蛋白质的分类为研究目标

    E

    需要对差异蛋白进行质谱分析


    正确答案： B,A
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    简述蛋白质组学研究成果的应用前景和展望。

    正确答案： （1）在基础研究方面：近几年来蛋白质研究技术已被应用于各种生命科学领域，如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上，覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围，涉及各种重要的生物学现象，如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。在未来的发展中，蛋白质组学的研究领域将更加广泛。
    （2）在应用研究方面：蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶标最有效的方法之一。在对癌症、早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治疗方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景，目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。
    （3）在技术发展方面：蛋白质组学的研究方法将出现多种技术并存，各有优势和局限的特点，而难以像基因组研究一样形成比较一致的方法。除了发展新方法外，更强调各种方法间的整合和互补，以适应不同蛋白质的不同特征。另外，蛋白质组学与其他学科的交叉也将日益显著和重要，这种交叉是新技术新方法的活水之源，特别是蛋白质组学与其他大规模科学如基因组学，生物信息学等领域的交叉，所呈现出的系统生物学研究模式，将成为未来生命科学最令人激动的新前沿。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    蛋白质芯片技术能够同时分析上千种蛋白质的变化情况，使得在全基因组水平研究蛋白质的功能成为可能，在基础医学研究和临床医学应用方面具有广泛的应用前景。蛋白质芯片在药物的临床应用研究主要为（）

    • A、寻找具有新的药学活性的小分子或蛋白质药物
    • B、寻找新的药物靶位
    • C、进一步确定已有药物和新药的靶位
    • D、药物疗效评价
    • E、在蛋白组学水平了解药物与蛋白质的结合

    正确答案:D

  • 第14题：

    某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。对其叶片进行了红光照射，光谱吸收测定和色素层析条带分析（从上至下），与正常叶片相比，实验结果是（）

    • A、光吸收差异显著，色素带缺第2条
    • B、光吸收差异不显著，色素带缺第2条
    • C、光吸收差异显著，色素带缺第3条
    • D、光吸收差异不显著，色素带缺第3条

    正确答案:B

  • 第15题：

    试述蛋白质组学的定义及其研究的内容。


    正确答案:蛋白质组学是指在特定的时间和特定的空间研究一个完整的生物体（或细胞）所表达的全体蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平‘翻译后的修饰’蛋白质与蛋白质相互作用等，从而在蛋白质水平上获得对于生物体生理、病理等过程的全面认识。
    研究内容：
    ①蛋白质的鉴定
    ②翻译后修饰
    ③蛋白质功能确定
    ④寻找药物的靶分子

  • 第16题：

    蛋白质组学的研究内容（）、（）、（）、（）。


    正确答案:蛋白质鉴定；翻译后修饰；蛋白质功能确定；寻找药物的靶分子

  • 第17题：

    蛋白质组学的研究内容有哪些？


    正确答案:蛋白质组学的研究包括两个方面：一是针对蛋白质表达模式的研究，一是在蛋白质功能模式方面的深入分析。

  • 第18题：

    简述蛋白质组学研究成果的应用前景和展望。


    正确答案: （1）在基础研究方面：近几年来蛋白质研究技术已被应用于各种生命科学领域，如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上，覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围，涉及各种重要的生物学现象，如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。在未来的发展中，蛋白质组学的研究领域将更加广泛。
    （2）在应用研究方面：蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶标最有效的方法之一。在对癌症、早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治疗方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景，目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。
    （3）在技术发展方面：蛋白质组学的研究方法将出现多种技术并存，各有优势和局限的特点，而难以像基因组研究一样形成比较一致的方法。除了发展新方法外，更强调各种方法间的整合和互补，以适应不同蛋白质的不同特征。另外，蛋白质组学与其他学科的交叉也将日益显著和重要，这种交叉是新技术新方法的活水之源，特别是蛋白质组学与其他大规模科学如基因组学，生物信息学等领域的交叉，所呈现出的系统生物学研究模式，将成为未来生命科学最令人激动的新前沿。

  • 第19题：

    质谱技术常用于以下哪项研究（）

    • A、基因组学
    • B、RNA组学
    • C、转录组学
    • D、蛋白质组学
    • E、比较基因组学

    正确答案:D

  • 第20题：

    问答题
    什么是蛋白质组学？其研究内容有哪些？

    正确答案： 蛋白质组学是指在特定的时间和特定的空间研究一个完整的生物体（或细胞）所表达的全体蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平、翻译后修饰、蛋白质与蛋白质间的相互作用等，从而在蛋白质水平获得对生物体生理、病理等过程的全面认识。
    其研究内容有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能的确定、寻找药物的靶分子。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    现代生物学研究多从‘全局’出发，研究细胞中整体基因的表达规律即生物组学，按照研究层面可进一步分成不同的组学。下列按照基因表达流程正确排列的组学为：（）
    A

    基因组学-蛋白质组学-转录组学-代谢组学

    B

    基因组学-转录组学-蛋白质组学-代谢组学

    C

    代谢组学-蛋白质组学-转录组学-基因组学

    D

    代谢组学-基因组学-蛋白质组学-转录组学


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    下列各项中不属于功能基因组学研究内容的是（）
    A

    蛋白质组学

    B

    鉴定（注释）基因

    C

    转录组学

    D

    描述基因表达模式

    E

    分析基因序列之间的差异与相似性


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    试述蛋白质组学的定义及其研究的内容。

    正确答案： 蛋白质组学是指在特定的时间和特定的空间研究一个完整的生物体（或细胞）所表达的全体蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平‘翻译后的修饰’蛋白质与蛋白质相互作用等，从而在蛋白质水平上获得对于生物体生理、病理等过程的全面认识。
    研究内容：
    ①蛋白质的鉴定
    ②翻译后修饰
    ③蛋白质功能确定
    ④寻找药物的靶分子
    解析： 暂无解析

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