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重组人红细胞生成素的分离纯化工艺过程。
题目
重组人红细胞生成素的分离纯化工艺过程。
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第1题：
简要介绍赖氨酸的分离纯化工艺的特点。
正确答案: 赖氨酸的分离纯化采用离子交换树脂吸附工艺。
赖氨酸是碱性氨基酸，在酸性溶液中以阳离子形式存在，能强烈被阳离子树脂吸附。常用铵型强酸性阳离子交换树脂，可选择性吸附碱性氨基酸，同时氨水洗脱后，树脂不必再生。 -
第2题：
简述生物分离纯化工过程的选择依据。
正确答案: 1、生产成本要低
2、工艺步骤要少
3、操作程序要合理
4、适应产品的技术规格
5、生产要有规模
6、产品具有稳定性
7、环保和安全要求
8、生产方式 -
第3题：
生物分离与纯化的一般工艺过程：（）
正确答案:原料的选取与预处理，分离提取，精制和成品制作 -
第4题：
酶的发酵生产的生产工艺包括了（）两个过程
- A、灭菌
- B、发酵
- C、分离纯化
- D、挑选
正确答案:B,C -
第5题：
简述酶分离纯化方法及工艺程序的选择策略。
正确答案:（1）先选用非特异的、低分辨的技术，去除主要的杂质并使酶溶液浓缩；如沉淀、超滤和吸附等。
（2）随后采用高效分离的手段；如离子交换层析、亲和层析。
（3）将最昂贵、最费时的分离单元放在最后阶段。如凝胶过滤层析。 -
第6题：
简述分离纯化工艺过程。
正确答案:1.培养液（发酵液）的预处理和固液分离，目的是除去发酵液中的菌体细胞
2.初步纯化（提取），目的是除去与产物性质差异较大的杂质，为后道精制工序创造有利条件；
3.高度纯化（精制），目的是去除与产物的物理化学性质比较接近的杂质
4.成品加工。据最终用途决定。 -
第7题：
简述酶分离纯化的过程？
正确答案: （1）材料的预处理：防止蛋白酶的水解作用，分离细胞器，除去核酸。
（2）细胞的破碎：机械匀浆法，超声波法，冻融法，渗透压法，酶水解法。
（3）酶的抽提。
（4）酶的分离纯化：沉淀分离法，层析法，电泳法，离心法。 -
第8题：
问答题简述重组人干扰素α-2b的分离工艺过程。正确答案： （1）菌体裂解。一定pH条件下，表面活性剂或强离子剂可使细胞裂解；
（2）预处理。加絮凝剂进行絮凝，加凝聚剂进行沉淀，离心；
（3）初级分离。盐析、离心、收集沉淀保存。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题重组人红细胞生成素的分离纯化工艺过程。正确答案： ①重组人红细胞生成素的分离
（1）CM－Sephrose亲和层析柱预先用Na-HAc-异丙醇活化，并用20mmol/LTrisHCl平衡缓冲液平衡。
（2）收获培养基滤膜过滤后上CM亲和层析柱，平衡缓冲液平衡。
（3）0～2mol/LNaCl，20mmol/LTris洗脱液梯度洗脱。
（4）收集活性洗脱峰10mmol/LTris透析液透析过夜。
②重组人红细胞生成素的纯化
（1）透析后的活性组分上预先平衡的DEAE离子交换柱。
（2）0～1mol/LNaCl-Tris洗脱液梯度洗脱，收集活性洗脱峰。
（3）上10%乙腈平衡的RP-HPLC柱（C4填料），10%～70%的乙腈溶液梯度洗脱，收集活性洗脱峰。
（4）上凝胶柱（预先用20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡），20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡并洗脱，收集活性洗脱峰（红细胞生成素）解析： 暂无解析 -
第10题：
单选题生物分离过程的一般步骤包括（）A预处理和固液分离
B初步纯化
C高度纯化和成品加工
D以上都是
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第11题：
多选题酶的发酵生产的生产工艺包括了（）两个过程A灭菌
B发酵
C分离纯化
D挑选
正确答案： D,A解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题论述多糖分离纯化工艺。正确答案： 多糖分离纯化工艺：
（1）分离
1、脱脂：动植物多糖或微生物细胞内多糖常被脂质包围，提取通常应先脱脂，释放多糖。常用醇或醚回流脱脂。
2、提取：脱脂后的残渣多用水溶性溶剂提取多糖.依多糖的性质采用冷水、热水，冷或热的氢氧化钠，乙酸或苯酚等溶液提取.用热水提取胞内多糖效果较佳.但单用热水提取细胞壁多糖效果不明显，还需用弱碱或酶解方法。溶剂性质、浸提温度、时间等均影响提取效果。用超声波技术可提高多糖提取率.提取方法依照不同种类的多糖的溶解性质而定，如昆布多糖、果聚糖、糖原易溶于水，而壳聚糖与纤维素溶于浓酸，几种常用多糖提取方法：对于难溶于冷水、热水，但可溶于稀碱液的多糖的提取方法这类多糖主要是不溶性胶类。用冷水浸润材料后用0.5mol/L氢氧化钠提取，并且提取液用盐酸中和浓缩后，加乙醇沉淀得到多糖.若在稀碱中仍不易溶出者，可加入硼砂，对于甘露聚糖、半乳聚糖等能形成硼酸配合物的多糖，此法可得到相当纯度的物质；对于易溶于温水、难溶于冷水和乙醇的多糖的提取方法，这类材料需要先用冷水浸过，再用热水提取，必要时可加热至80-90度，搅拌提取，提取液用正丁醇与氯仿混合液除去杂蛋白，离心除去杂蛋白后的清液，透析后用乙醇沉淀即.c.除去杂质，上述提取液中含无机盐、小分子有机物质和大分子蛋白质、木质素等需要除去杂质.工业化生产生产中一般采用离子交换、凝胶过滤或超滤来除去这些杂质.对于大分子杂质，可用酶法降解，再用乙醇、丙酮溶剂沉淀或配合物，脱蛋白质是分离多糖的一个重要步骤，经常用以下几种方法：seveg法、三副三氯乙烷法、三氯乙酸法酶法和等电点沉淀法。
（2）纯化经过脱蛋白质和去除小分子小分子杂质的提取液是含有多种组分的多糖混合物，因此，要得到单一多糖组分，还需经过纯化步骤。常用的纯化方法有：
1、沉淀法就是利用不同分子量的多糖在不同分子量的多糖在不同浓度的低级醇或低级酮中溶解性不同的原理，来逐步提高溶液中醇或酮的浓度，以使不同组分的多糖依分子量由大至小的顺序沉淀，最终达到分离的目的，其中，乙醇沉淀是分离纯化多糖的经典方法。
2、盐析法就是利用不同多糖与金属离子成盐后在水溶液中的特异性沉淀作用，用硫酸胺、乙酸钾或乙醇胺等盐析剂，将不同的多糖逐步析出。
3、季铵盐沉淀法酸性多糖在溶液中，以聚阴离子形式存在，这样就与碱性表面活性剂长链季铵盐或碱形成水不溶性配合物而沉淀.酸性强、分子量大的酸性多糖首先沉淀.通过控制季铵盐的浓度，便能够分离不同的酸性多糖。常用的季铵盐化合物有十六烷基三甲基溴化铵，十六烷基三甲基羟化铵和十六烷基溴化吡啶，其纯度要求应大于95％，可配制1％-10％的水溶液，或溶解与多糖溶液相同浓度的盐溶液。
4、纤维素柱色谱柱与分级沉淀相反，利用不同的多糖在不同浓度乙醇中溶解性不同的特点，先用4倍体积的乙醇将混合多糖溶液沉淀在惰性的多孔纤维素柱上，在按由高至低的顺序，用不同浓度的乙醇洗脱，将不同多糖分开.多糖经乙醇沉淀于介质上，大大增加了洗脱溶剂与沉淀的接触面积，避免了乙醇沉淀时可溶性成分被沉淀包裹的现象，使分离效果得以改善。
5、离子交换色谱法利用不同多糖分子电荷密度不同，而与离子交换剂中的离子或某些基团发生电性结合.其亲和力随着多糖结构与电离性质不同，一般随着分子中酸性基团的增加而增强，线状分子、分子量较大的多糖亲和力较强，支链多糖较直链多糖更易吸附，而后使用不同浓度的盐溶液取代多糖离子，便能获得不同级分的多糖.常用的离子交换剂有树脂类、纤维素类和葡聚糖类等。
6、金属配合物法不同多糖能与铜、钙、铁、铅等金属离子形成配合物而沉淀.根据这一性质，可使用各种配位剂沉淀多糖.经水充分洗涤后，用体积分数为5％的无机酸、乙醇或硫化氢处理，使配合物分解，得到游离多糖。常用配位剂有氯化铜、氢氧化钡、醋酸铅和硫酸铜等。
7、凝胶柱色谱常用的凝胶有葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶，以不同浓度的盐溶液和缓冲液作为展层剂，其离子浓度最好高于0.02mol/L。解析： 暂无解析 -
第13题：
以重组人血管内皮抑制素（恩度）为例，设计药物制造过程中表达与纯化的试验方案。
正确答案: （1）重组人血管内皮抑制素的性质要点
血管内皮抑制素是胶原蛋白XVⅢC端NC1区域一段蛋白酶降解产物。具有紧密的三级结构、两对独特的呈巢式排列的二硫键以及N末端结合一个锌离子。重组人血管内皮抑制素是应用基因重组技术生产的生物药物，具有与人血管内皮抑制素相同的结构和生物学活性。重组人血管内皮抑制素为血管生成抑制类新生物制品，其作用机理是通过抑制形成血管的内皮细胞迁移来达到抑制肿瘤新生血管的生成，阻断了肿瘤细胞的营养供给，从而达到抑制肿瘤增殖或转移目的。
（2）选择表达、纯化体系的依据
表达体系：关于药物、规模、经济的考虑。
纯化体系：主要根据重组蛋白分离纯化的特点，联合使用不同分离纯化机理的方法，达到分离纯化的目的。 （3）表达体系的设计
（4）分离纯化体系的设计 -
第14题：
简述发酵生物产品分离纯化的生产工艺
正确答案: 原材料的预处理
颗粒性杂质的去除
可溶性杂质的去除和目标产物的初步纯化
目标产物精制
目标产物的成品加工 -
第15题：
生物分离过程的一般步骤包括（）
- A、预处理和固液分离
- B、初步纯化
- C、高度纯化和成品加工
- D、以上都是
正确答案:D -
第16题：
如何对酶分离纯化方法及工艺程序的优劣进行评价？
正确答案:一个完整的酶制备方案包括酶测定方法的建立、材料的选择、预处理对酶性质的初步探索、制定酶的纯化程序、酶成品的保存。
评价分离纯化方法及工艺程序优劣的指标：
1.活力的回收率
2.化倍数：比活力提高的倍数
因此在酶的分离纯化过程中必需测定每一步的酶液体积（mL）、蛋白含量（mg/mL）、酶活（U/mL）. -
第17题：
酶发酵的生产工艺包括（）
- A、化学合成
- B、发酵
- C、分离纯化
- D、灭菌
正确答案:B,C -
第18题：
分离纯化工艺设计的原则是什么？
正确答案: 1.技术路线、工艺流程尽量简单化
2.尽可能采用低成本的材料和设备
3.将完整工艺流程规划为不同的工序
4.注意时效性，应优选可缩短各工序纯化时间的加工条件
5.采用成熟技术和可靠设备
6.以适宜的方法检测纯化过程、产物产量和活性，对纯化过程进行监控等 -
第19题：
问答题简要介绍赖氨酸的分离纯化工艺的特点。正确答案： 赖氨酸的分离纯化采用离子交换树脂吸附工艺。
赖氨酸是碱性氨基酸，在酸性溶液中以阳离子形式存在，能强烈被阳离子树脂吸附。常用铵型强酸性阳离子交换树脂，可选择性吸附碱性氨基酸，同时氨水洗脱后，树脂不必再生。解析： 暂无解析 -
第20题：
填空题生物分离与纯化的一般工艺过程：（）正确答案： 原料的选取与预处理，分离提取，精制和成品制作解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题论述生物产物分离纯化工艺设计的影响因素。正确答案： 1.抑制细胞或分泌产物中分解酶的活性，防止其消化讲解待提纯产物以保持其生物活性
2.去除细胞或分泌物中非目标产物的成份，同时尽量保持较高的目标产物成份的回收率
3.优先选择与组合各种分离纯化技术检测手段进行质量控制
4.对分离纯化过程选用适宜的技术检测手段进行质量控制
5.对分离纯化工艺以及所用的分离纯化介质、设备进行验证解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题分离纯化工艺设计的原则是什么？正确答案： 1.技术路线、工艺流程尽量简单化
2.尽可能采用低成本的材料和设备
3.将完整工艺流程规划为不同的工序
4.注意时效性，应优选可缩短各工序纯化时间的加工条件
5.采用成熟技术和可靠设备
6.以适宜的方法检测纯化过程、产物产量和活性，对纯化过程进行监控等解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述紫杉醇分离纯化工艺过程。正确答案： 由石油醚固-液萃取、碱洗、己烷沉淀、一次层析、一次结晶、溴加成、二次层析和二次结晶8道工序构成。解析： 暂无解析