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参考答案和解析
正确答案: A.变性:双链DNA变成单链DNA。变性温度的高低由G+C含量决定;变性时间由DNA链长度决定。常规PCR变性条件为94~95度45s。
B.退火,将温度下降至适宜温度,使引物与模板DNA退火结合;退火是使引物和模板DNA复性。复性过程采取的温度(Ta)至关重要。复性温度过高,引物不能与模板很好地复性,扩增效率很低;复性温度太低,引物将产生非特异性复性,导致非特异性的DNA片段的扩增。退火温度通常在比理论计算的引物和模板的熔解温度低3~5℃的条件下进行。
C.延伸:寡核苷酸引物的延长,一般在耐热DNA聚合酶的最适温度下进行。对于Taq酶,为72~78度。
D 循环数:PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率。
一般扩展条件:94℃60s 37℃60s 72℃120s,共25-30个循环。
更多“PCR反应一般分为几个步骤?各步骤有什么特点?”相关问题
  • 第1题:

    简述PCR原理及其基本反应步骤。


    正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
    ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
    ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
    ③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板互补的DNA链。

  • 第2题:

    刮削分几个步骤?各是什么?


    正确答案: 刮削分三个步骤。分别是粗刮、细刮、精刮。

  • 第3题:

    多相催化反应一般包括哪几个步骤?其中哪几个步骤属于化学过程?


    正确答案: 包括:1)外扩散;2)内扩散;3)吸附;4)表面化学反应;5)脱附;6)内扩散;7)外扩散。
    其中,反应物分子在催化剂表面的化学吸附,表面化学反应以及产物的脱附,属于化学过程。

  • 第4题:

    甲醇催化反应过程有几个步骤?


    正确答案: 甲醇合成反应是一个气固相催化反应的过程,共分五步:一氧化碳和氢气扩散到催化剂表面;一氧化碳和氢气被催化剂表面吸附;一氧化碳和氢气在催化剂表面进行化学反应;甲醇在催化剂表面脱附;甲醇扩散到气相中去。其中第三步进行的较慢,整个反应过程取决于该步的进行速度,因此,影响反应的各个因素应控制在最适合反应进行的条件下。

  • 第5题:

    编制列车运行图分几个步骤?各步骤都解决什么问题?


    正确答案:分两个步骤,第一步编制列车运行方案图,着重解决运行图的全面布局问题,它只是对每一方向画出各技术站间的列车运行线,不详细画出经过每,车站的时刻。第二步根据方案图铺画详细的运行图,即详细规定出每一列车在各个站上到、发或通过时刻。

  • 第6题:

    PCR原理是什么?其基本步骤如何?解释各步骤的目的。


    正确答案:类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
    PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
    ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
    ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
    ③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链;重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”。

  • 第7题:

    PCR反应包括三个基本步骤:()、()和()。


    正确答案:变性;退火;延伸

  • 第8题:

    PCR反应包括()、()和()三个步骤。


    正确答案:变形;复性;延伸

  • 第9题:

    金属矿床露天开采分几个步骤,各是什么?


    正确答案: 分五个步骤
    1.矿区地面准备,
    2.矿床疏干,防水和排水,
    3.矿山基本建设,
    4.露天矿山生产阶段-剥离与采矿,
    5.复土造田。

  • 第10题:

    问答题
    什么叫PCR技术?有几个操作步骤?

    正确答案: PCR技术称DNA多聚酶链式反应。是DNA体外扩增的技术。
    步骤:
    (1)加热变性:将待扩增的DNA置于94~95摄氏度的哥嫂问水浴中加热5分钟,使双键DNA解链为单链DNA,分开的两条单链DNA作为扩增的模板。
    (2)退火:将加热变性的单链DNA溶液的温度缓慢下降至55摄氏度后,在这过程中将引物DNA的碱基与单链模板DNA一端碱基互补配对。
    (3)延伸:在退火过程中,当温度下降至72摄氏度时,在耐热性TaqDNA多聚酶、适应的pH和一定的离子强度下,寡核苷酸引物碱基和模板DNA结合延伸成双链DNA。经过30~35次循环,扩增倍数达106,可将长达2kb的DNA由原来的1pg扩增到0.5~1μg。若经过60次循环,DNA扩增倍数可达109~1010
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    填空题
    PCR反应过程分为三个步骤,即(),()和()。

    正确答案: 变性,退火,延伸
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    什么叫异相燃烧?异相化学反应分为几个步骤?

    正确答案: 异相燃烧是指不同相的物质之间发生的燃烧反应。
    通常气固异相反应包括如下步骤:
    第一步:O2必须通过扩散到达碳的表面,并被碳表面吸附
    第二步:在碳表面上进行碳—氧反应,并生成反应产物
    第三步:反应产物从碳的表面上脱离(解吸),并从碳表面向外扩散开去
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    什么是PCR,有什么特点,扩增反应有哪几个步骤?


    正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤,变性、退火(复性)、延伸3个步骤。

  • 第14题:

    煤炭销售业务流程有哪几个步骤?各步骤的主要内容是什么?


    正确答案: (1)购煤:
    1.凡是购煤用户必须先与矿供销科洽谈购煤意向,经矿领导批准后,与用户签订煤炭购销正式合同(合同一式三份:用户、财务、存档),请示公司运销处同意后,开具发煤通知单。发煤通知单一式二联,一联留存备查,二联留财务科。
    2.用户持发煤通知单到银行将煤款存入指定账户,并将发煤通知单及交款凭证交煤矿收款结算人员。矿收款结算人员经审核无误后,开据收款收据,登记回款台账,在发煤通知单上签字认可并加盖财务专用章。
    (2)发煤:
    1.用户持发煤通知单到磅房办理发运手续,司磅员接到手续齐全的通知单后,登记用户发运台账,司磅员凭用户开据的运输车辆派车单或用户委托的专职发货人员(有委托书)签字认可后方可进行空车计量,开据装车通知单。
    2.煤场管理人员依据装车通知单,首先对车辆进行认真检查,确认无异常情况后,带领车辆到指定地点装车,组织装车人员进行装车,并对装车全程进行监督检查,装车完毕后在装车通知单上签字认可。
    3.用户装车完毕后凭签字后的通知单到磅房重车计量,磅房人员计算净重后,经用户或车主签字认可后,开具过磅单和出门证,并开具煤炭产品销售证明(准销证),登记用户发运台账。
    4.车辆出门时,由门卫收取出门证并确认车号和煤种无误后放行。5.司磅员根据当天的发运台账、销售证明(准销证)与用户派车单进行核对,作到日清月结,并及时编制日报表和月度报表,上报结算人员及相关部门。
    (3)结算:
    1.月末,结算人员根据磅房上报的月报和登记的发运台账、回款台账,与用户开具的结算证明单核对无误后,办理相关结算手续,向用户开具发票,同时要做好与用户的对账工作,确保双方账目相符。
    2.结算人员根据已开发票和发运情况,及时登记发票登记台账、销售明细账和超发、代存台账。
    3.结算人员根据发运和开票情况,月末编制煤炭销售报表:煤炭销售明细表、预收(欠款)明细表、超发代存明细表。
    4.结算人员负责对相关台账及各类报表定期进行核对并整理归档。

  • 第15题:

    焦油脱水分为几个步骤?分别在什么装置中进行?


    正确答案: 焦油脱水可分为初步脱水和最终脱水两步骤,初步脱水是在焦油贮槽内进行,最终脱水是在管式炉对流段和一次蒸发器内进行。(间歇蒸馏是在专用脱水釜内进行)。

  • 第16题:

    装盘一般分为几个步骤?


    正确答案: 有垫底、围边(码边)、盖面三个步骤。

  • 第17题:

    新产品的试制,一般分为哪几个步骤?


    正确答案: 新产品试制一般分为样品试制和小批试制两个步骤。
    ①样品试制。其目的是考核产品设计质量,考验产品结构、性能及主要工艺,验证和修正设计图纸,使产品设计基本定型。
    ②小批试制。其目的是考验产品的工艺,检查产品的工艺性,验证全部工艺文件和工艺装备,并对产品图纸再进行一次审查和修改。

  • 第18题:

    呼叫处理中,任何一个任务的完成都需要经过哪几个步骤?各步骤的任务是什么?


    正确答案: 在呼叫处理过程中,处理机要完成许多的任务,而每一个任务的完成都需要经过输入处理、分析处理和内部任务的执行和输出处理这三个步骤。
    (1)输入处理:这是数据采集部分。该步骤识别并接受从外部输入的处理请求信号。
    (2)内部分析:这是内部数据处理部分。该步骤根据输入信号和交换机设备状态对数据进行分析、判别,然后决定下一步任务。
    (3)内部任务的执行和输出处理:这是输出命令部分。该步骤根据内部分析结果,发布一系列控制命令。

  • 第19题:

    MM4系列变频器的调试步骤分几个步骤,各是什么,每步作用是什么?


    正确答案:3个步骤,即参数复位调试、快速调试和功能调试。参数复位是将变频器参数恢复到出厂状态下的默认值操作;快速调试是指通过设置电动机参数、斜坡函数参数和变频器的命令源及频率给定源等参数,从而达到简单、快速运转电机的一种调速方式。功能调试是指用户按照具体生产工艺需要进行的设置操作。

  • 第20题:

    什么是PCR扩增法,其原理、操作步骤、反应过程和意义?


    正确答案: PCR技术是一种用于体外扩增位于两端已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。
    PCR原理:PCR技术的实质为体内DNA复制的体外模拟。即使双链DNA热变性而分开成为单链DNA,退火后在低温下,两个与模板互补的引物与单链DNA配对结合,再在中温下利用TAGDNA聚合酶的聚合活性和热稳定性进行聚合(延伸)反应。每经过一次变性、退火和延伸为一个循环,所扩增的特定DNA序列数是按几何指数增长。
    PCR技术操作步骤为:
    ①反复将目的基因片段进行热变性处理,令其双股链解开;
    ②进行反链杂交、退火、形成单链;
    ③用TagDNA聚合酶沿DNA链全程合成出两股双链DNA分子;
    ④然后开始第二个反应周期。每个反应周期,特异性目的基因可扩增一倍。用n代表反应周期数,则特异性DNA目的基因片段便按2^n指数扩增下去,一直扩增至所需数量为止。
    PCR反应过程:
    ①DNA的变性:DNA双链在加热或碱性条件下,双链的氢键断裂为单链DNA,一般解链温度为85-95℃;
    ②引物与单链DNA退火结合:单链DNA在温度逐渐降低时,重新与其互补的引物或另一条单链结合形成双链,称为退火;
    ③引物延伸:以目标DNA为模板,以引物为固定起点,以四种脱氧核苷三磷酸为底物在DNA聚合酶的作用下,由5’端向3’端的方向进行DNA复制。
    意义:PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因DNA片段,且全部操作已实现自动化,这一技术不仅广泛应用于基因重组操作中的基因扩增及其检出,而且在研究火花的致癌基因、等会基因序列变异,以及分子生物学、医学、食品、农业、化工的许多领域中都得到广泛的应用。

  • 第21题:

    问答题
    PCR反应一般分为几个步骤?各步骤有什么特点?

    正确答案: A.变性:双链DNA变成单链DNA。变性温度的高低由G+C含量决定;变性时间由DNA链长度决定。常规PCR变性条件为94~95度45s。
    B.退火,将温度下降至适宜温度,使引物与模板DNA退火结合;退火是使引物和模板DNA复性。复性过程采取的温度(Ta)至关重要。复性温度过高,引物不能与模板很好地复性,扩增效率很低;复性温度太低,引物将产生非特异性复性,导致非特异性的DNA片段的扩增。退火温度通常在比理论计算的引物和模板的熔解温度低3~5℃的条件下进行。
    C.延伸:寡核苷酸引物的延长,一般在耐热DNA聚合酶的最适温度下进行。对于Taq酶,为72~78度。
    D 循环数:PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率。
    一般扩展条件:94℃60s 37℃60s 72℃120s,共25-30个循环。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    什么是PCR,有什么特点,扩增反应有哪几个步骤?

    正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤,变性、退火(复性)、延伸3个步骤。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    编制列车运行图分几个步骤?各步骤都解决什么问题?

    正确答案: 分两个步骤,第一步编制列车运行方案图,着重解决运行图的全面布局问题,它只是对每一方向画出各技术站间的列车运行线,不详细画出经过每,车站的时刻。第二步根据方案图铺画详细的运行图,即详细规定出每一列车在各个站上到、发或通过时刻。
    解析: 暂无解析