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  • 第1题:

    用λ噬菌体作克隆载体时,外源DNA片断越小,克隆的成功率越高。


    正确答案:错误

  • 第2题:

    常用的运载体有哪些?


    正确答案:常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。

  • 第3题:

    在基因克隆中常用的载体有质粒、柯斯质粒等4种,按载体所能克隆的外源DNA片段的大小,其从大到小的顺序是()、()、()、()。


    正确答案:YAC载体;柯斯质粒;噬菌体载体;质粒

  • 第4题:

    克隆载体的必要条件是哪些?


    正确答案:克隆载体应具备的必要条件:
    ① 具有复制子,在宿主细胞内可自主地复制,并携带重组DNA分子一同扩增;
    ② 有单一限制性内切酶的酶切位点或多克隆位点  (multiple cloning site,MCS),MCS是人工合成的一段含有多个不同的单一限制性内切酶切点的 DNA序列,它有利于外源基因插入该区域;
    ③ 有选择性遗传标记,如抗药基因、酶基因、营养缺陷体及噬菌斑形成能力等,便于筛选出阳性重组体;
    ④ 拷贝数高(10—200个/每个细胞),易于分离;
    ⑤ 生物安全性好。

  • 第5题:

    作为载体的M13噬菌体()。

    • A、为双链DNA分子
    • B、能够作为克隆基因组文库的载体
    • C、可以在大肠杆菌中表达
    • D、能够克隆大于10kb的DNA片段
    • E、能够作为克隆cDNA文库的载体

    正确答案:A

  • 第6题:

    酵母的克隆载体有哪几种,它们的基本特点是什么?


    正确答案:酵母菌载体 (Yeast vector) 依其能否独立复制可分为结合载体和复制载体。它们的基本特点是: 结合载体(Integrating vector):载体没有复制序列,必须嵌入酵母菌的染色体内才能随着细胞分裂时分裂。一般用作制备基因文库用。 复制载体(Replicating vector):载体有与复制相关的序列,依其复制序列种类可分为:
    (1) 2 μ 质粒:从酵母菌天然的质粒上截取一段包含复制序列的 2μ DNA。 其优点是非常稳定,可确保细胞分裂时,质粒的性状可移交到子代中不遗失。
    (2)ARS 质粒:从酵母菌的染色体中截取一段ARS 片段。ARS是表示Autonomously replicatingsequence。ARS 质粒的稳定性较差,质体常被分解而无法代代相传。但是若加入一段着丝粒序列(centromere sequence ),变成CEN 质粒,就可使质粒稳定性提高,但CEN 质粒的拷贝数较低,一般为单拷贝。
    (3)酵母人工染色体(YAC ,yeast artificial chromosome),这种载体除了上述ARS, CEN序列外,两端再加上端粒序列,形成彷彿就是染色体般的外观,故名之。 其特性是容量 (capacity) 超大,可承载 0.2 - 2.0 Mb DNA的长度。多被用于构建基因组文库用。

  • 第7题:

    基因克隆的载体的概念及必须具备哪些性能?请列举三个基因载体。


    正确答案: 基因克隆的载体是把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具。必须具备的性能:
    ①本身是一个复制子,能自我复制,在受体细胞中大量繁殖;
    ②相对分子质量小;
    ③载体具有选择性的遗传标志,可供受体细胞辨认的表型特征;
    ④载体具有多个限制性内切酶的单一切点。
    三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。

  • 第8题:

    酶基因克隆有哪些常用的方法?


    正确答案:(1)根据已知序列来扩增目的基因
    (2)根据已知探针从基因文库中钓取目的基因
    (3)未知序列基因的打靶

  • 第9题:

    判断题
    基因工程制药中常用的目的基因克隆载体主要有M13噬菌体和粘粒。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    多选题
    基因工程中常用的载体的种类有()
    A

    表达载体

    B

    质粒载体

    C

    克隆载体

    D

    转基因载体


    正确答案: C,A
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    不常用作克隆载体的是()。
    A

    质粒

    B

    λ噬菌体

    C

    DNA病毒

    D

    RNA病毒


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    作为载体的M13噬菌体()。
    A

    为双链DNA分子

    B

    能够作为克隆基因组文库的载体

    C

    可以在大肠杆菌中表达

    D

    能够克隆大于10kb的DNA片段

    E

    能够作为克隆cDNA文库的载体


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    PET属于()

    • A、克隆载体
    • B、穿梭载体
    • C、表达载体
    • D、分泌载体

    正确答案:C

  • 第14题:

    克隆载体


    正确答案: 携带插入外源片段的质粒或噬菌体,从而产生更多物质或蛋白质产物。

  • 第15题:

    构建质粒克隆载体的基本策略


    正确答案: 1.能在受体中进行有效的复制(有复制起始位点)
    2.含多克隆位点
    3.含有供选择克隆子的标记基因,如:常用的标记基因:Apr,Kmr,Smr,Tcr基因等
    .4DNA分子尽可能小和较高的拷贝数。5根据特殊需要,组装各种“元件”,构建不同用途的质粒克隆载体

  • 第16题:

    作为克隆载体的质粒应具备哪些特点?


    正确答案: (1)分子量相对较小,能在细菌内稳定存在,有较高的拷贝数。
    (2)具有一个以上的遗传标志,便于对宿主细胞进行选择,如抗生素的抗性基因、β-半乳糖苷酶基因(lac Z)等。
    (3)具有多个限制性内切酶的单一切点,便于外源基因的插入。如果在这些位点有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。

  • 第17题:

    基因工程中常用的载体的种类有()

    • A、表达载体
    • B、质粒载体
    • C、克隆载体
    • D、转基因载体

    正确答案:A,C

  • 第18题:

    目前工程资料载体的常用形式有纸质载体、()、()、光盘载体。


    正确答案:缩微品载体;磁性载体

  • 第19题:

    不常用作克隆载体的是()。

    • A、质粒
    • B、λ噬菌体
    • C、DNA病毒
    • D、RNA病毒

    正确答案:D

  • 第20题:

    问答题
    酵母的克隆载体有哪几种,它们的基本特点是什么?

    正确答案: 酵母菌载体 (Yeast vector) 依其能否独立复制可分为结合载体和复制载体。它们的基本特点是: 结合载体(Integrating vector):载体没有复制序列,必须嵌入酵母菌的染色体内才能随着细胞分裂时分裂。一般用作制备基因文库用。 复制载体(Replicating vector):载体有与复制相关的序列,依其复制序列种类可分为:
    (1) 2 μ 质粒:从酵母菌天然的质粒上截取一段包含复制序列的 2μ DNA。 其优点是非常稳定,可确保细胞分裂时,质粒的性状可移交到子代中不遗失。
    (2)ARS 质粒:从酵母菌的染色体中截取一段ARS 片段。ARS是表示Autonomously replicatingsequence。ARS 质粒的稳定性较差,质体常被分解而无法代代相传。但是若加入一段着丝粒序列(centromere sequence ),变成CEN 质粒,就可使质粒稳定性提高,但CEN 质粒的拷贝数较低,一般为单拷贝。
    (3)酵母人工染色体(YAC ,yeast artificial chromosome),这种载体除了上述ARS, CEN序列外,两端再加上端粒序列,形成彷彿就是染色体般的外观,故名之。 其特性是容量 (capacity) 超大,可承载 0.2 - 2.0 Mb DNA的长度。多被用于构建基因组文库用。
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    单选题
    链末端终止法是目前最通用的DNA测序技术,应掌握其基本原理、主要步骤和体系组成,并熟悉其特点。对于未知序列测序,链末端终止法的测序引物为()
    A

    其亚克隆载体序列的随机引物

    B

    其亚克隆载体序列的定向引物

    C

    其亚克隆载体序列的待测引物

    D

    其亚克隆载体序列的通用引物

    E

    其亚克隆载体序列的双链引物


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    名词解释题
    克隆载体

    正确答案: 携带插入外源片段的质粒或噬菌体,从而产生更多物质或蛋白质产物。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    亲和层析对载体有哪些要求?常用的载体有哪些?

    正确答案: (1)载体必须能充分功能化,也就是说载体要具有足够数量的功能基因,或能方便地引入足量的化学活性基因,以供与配基进行共价连接只用。
    (2)载体必须有较好的理化稳定性和生物惰性,尽量减少非专一性吸附。这样的载体就能耐受亲和、洗涤、洗脱等各种条件下处理而不改变其膨胀度、网孔结构和硬度等性质。此外,载体还应不易为酶破坏,也不能为微生物所利用,这样可使亲和固定相便于使用和保存。
    (3)载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。载体的亲水性往往是保证被吸附生物分子稳定的重要因素之一。同时,亲水性还有助于亲和对达到亲和平衡,并减少因疏水力造成的非特异性吸附。
    (4)载体应具有多孔的立体网状结构,能使被亲和吸附的大分子自由通过。高度的多孔性对大分子自由流动是必需的,同时也为提高配基及配体的亲和有效浓度提供了条件,使之接近溶液中的状态,这种状态十分有利于亲和对的两种成分在自由溶液中发生的相互作用。
    常用的载体有纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、葡聚糖凝胶、多孔玻璃珠等。
    解析: 暂无解析