单克隆抗体制备中杂交瘤细胞筛选常用的筛选培养基是：A．HAT培养基B．DMEM培养基C．MEM培养基D．干细胞培养基

第1题：

第2题：

下列有关制备单克隆抗体的叙述中，错误的是（）

• A、采用的细胞工程技术包括细胞培养和细胞融合
• B、两次筛选的目的分别是筛选出杂交瘤细胞和筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
• C、要先用胃蛋白酶处理得到单个细胞，然后用诱导剂处理得到杂交瘤细胞
• D、运用的生物学原理包括细胞分裂和细胞膜具有一定的流动性

正确答案:C

第3题：

“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是（）。

• A、在全营养的培养基中，筛选大肠杆菌
• B、在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
• C、用纤维素为唯一碳的培养基，筛选能够分解纤维素的微生物
• D、在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物

正确答案:A

第4题：

单克隆抗体的特异性取决于（）

• A、抗原的纯度
• B、融合细胞的选择
• C、HAT中的培养
• D、克隆细胞的筛选
• E、培养基中细胞的抗原刺激

正确答案:D

第5题：

运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是（） ①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ⑥大量培养杂交瘤细胞 ⑦诱导细胞融合 ⑧单克隆抗体的大量制备

• A、②④③⑦⑤①⑥⑧
• B、②③④⑦①⑤⑥⑧
• C、④③⑦②⑤①⑧⑥
• D、③④⑦①⑤⑧⑥②

正确答案:B

第6题：

单克隆抗体的制备操作至少要进行几次细胞筛选（）

• A、1次
• B、2次
• C、3次
• D、4次

正确答案:B

第7题：

简述利用有限稀法筛选杂交瘤细胞的过程。

正确答案: 于克隆前一日向96孔板中加入0.1ml细胞悬液，于37℃CO₂培养箱中温育，然后从阴性孔中吸取细胞计数，用完全培养基稀释成30个／ml加入96孔板中，每孔0.1ml，余下细胞再稀释成10／ml，再加于两块96孔板中，每孔板中，每孔0.1ml。再制备3个／ml细胞悬液，加入另外两块96孔板中，将上述各板置37℃CO₂培养箱中培养2-3周，待出现可见细胞集落后，检查培养液中抗体活性，选出阳性孔，扩大培养，如上法进行反复克隆，直至选出纯杂交瘤细胞为止。

第8题：

单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的。杂交瘤细胞是经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞。为便于筛选融合细胞，选用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷（HGPRT-）的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT（次黄嘌呤、氨甲蝶呤、胞苷）选择培养基中培养，此时只有融合细胞才能生长和繁殖。请解释选择原理。

正确答案:细胞内核苷酸合成有两条途径，一是从头合成途径，另一条是补救途径。对于B细胞，由于不能在培养基上繁殖，所以未融合的B细胞不能在培养基上繁殖。对于肿瘤细胞，因为是HGPRT缺陷型，因而它不能通过补救途径合成核苷酸；又因为选择性培养基HAT中含氨甲蝶呤，它是叶酸的拮抗剂，叶酸是嘌呤和嘧啶核苷酸从头合成途径中转移一碳单位的辅酶（四氢叶酸）的来源，所以氨甲蝶呤抑制了核苷酸的从头合成途径，这样未融合的肿瘤细胞也不能在选择性培养基上生长和繁殖，只有融合细胞具有了双亲的遗传性，才能在HAT选择性培养基中利用补救途径合成核苷酸，从而生长和繁殖。

第9题：

为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞？

正确答案: 在HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）。
由于选用次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型（HPRT－）骨髓瘤细胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型（TK－）骨髓瘤细胞为亲本，该细胞只能通过全合成途径合成DNA。因为淋巴细胞具有合成DNA的两条途径，因此杂种细胞通过互补作用获得HRPT或TK基因，可应用培养基中次黄嘌呤及胸腺嘧啶核苷，通过补救合成途径合成DNA。
在HAT培养基中，HPRT-或TK-亲本骨髓瘤细胞死亡，B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于二周内均死亡，只有杂种细胞存活

第10题：

单克隆抗体制备的技术包括（　）

• A、免疫脾细胞的制备
• B、骨髓瘤细胞的培养与筛选
• C、细胞融合
• D、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养
• E、阳性杂交瘤细胞的冻存

正确答案:A,B,C,D,E

第11题：

第12题：

第13题：

下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是（）

• A、制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养
• B、需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
• C、利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞
• D、需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞

正确答案:C

第14题：

下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（）

• A、制备过程中不需要动物细胞培养技术
• B、杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点
• C、经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产
• D、单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂

正确答案:D

第15题：

杂交瘤细胞系的产生与筛选？

正确答案: 脾B细胞+骨髓瘤细胞，加聚乙二醇（PEG）促进细胞融合，HAT培养基中培养（内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T）生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。
细胞融合物中包含：脾-脾融合细胞：不能生长，脾细胞不能体外培养。
骨-骨融合细胞：不能利用次黄嘌呤，但可通过第二途径利用叶酸还原酶合成嘌呤。氨基蝶呤对叶酸还原酶有抑制作用，故不能生长骨-脾融合细胞：在HAT中能生长，脾细胞可以利用次黄嘌呤，骨细胞提供细胞分裂功能。

第16题：

单纯疱疹病毒I型（HSV-I）可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题：在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗（）的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了（）反应，再从小鼠的（）中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的（）细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是（）。

正确答案:HSV-1蛋白；体液免疫；脾脏；骨髓瘤；既能无限增殖又能产生抗体

第17题：

生产单克隆抗体时，不必要的操作是（）

• A、对小动物注射特定抗原
• B、用核移植技术构建杂交瘤细胞
• C、用选择性培养基筛选杂交瘤细胞
• D、对杂交瘤细胞进行抗体检测

正确答案:B

第18题：

下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤： ①获取骨髓瘤细胞和能产生抗X抗体的B淋巴细胞： ②将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养； ③筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞； ④利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞： ⑤从腹水中提取抗体； ⑥利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合。 以下对单克隆抗体制备的相关叙述中错误的是（）

• A、实验顺序应当是①⑥④③②⑤
• B、②产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆
• C、⑥过程获得的细胞均可无限增殖
• D、该过程产生的抗X抗体特异性强、灵敏度高

正确答案:C

第19题：

单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞

• A、②④
• B、①③⑤
• C、①②③④
• D、②③

正确答案:C

第20题：

通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B细胞③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（）

• A、②③① 
• B、③①② 
• C、②①③ 
• D、①③②

正确答案:C

第21题：

什么是HAT培养基？单克隆抗体制备过程中利用HAT培养基选择杂交瘤细胞的原理是什么？

正确答案: HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基。DNA合成途径有两种：从头合成和补救途径。免疫脾细胞没有培养特性，不能存活，瘤细胞从头途径被A阻断，自身是HPRT-或（TK-），补救途径被阻断，杂交瘤细胞可以通过融合的脾细胞弥补瘤细胞缺陷，从而在HAT培养基上存活。

第22题：

第23题：

第24题：