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简答题3：选用病毒载体克隆目的基因的时候有哪些需要特别注意的问题呢？

题目

简答题3：选用病毒载体克隆目的基因的时候有哪些需要特别注意的问题呢？

相似考题

1.重组DNA技术的基本步骤包括A、选择载体和获取目的基因B、目的基因与载体酶切后连接C、重组DNA导入受体细胞D、筛选阳性克隆E、分、切、接、转、筛

2.创新教育载体的内容有哪些?(简答题)

3.DNA克隆过程不包括以下步骤A.获取目的基因 B.选择与构建载体 C.筛选转化子 D.载体基因DNA测序

4.DNA克隆过程的步骤中不包括A．获取目的基因B．选择与构建载体C．目的基因与载体的拼接D．载体基因DNA测序E．筛选转化子

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  • 第1题：

    重组DNA基本过程包括


    A.目的基因的获取
    B.克隆载体的构建
    C.目的基因与载体的拼接
    D.重组分子导入受体菌

    答案：A,B,C,D
    解析：

  • 第2题：

    基因工程制药中常用的目的基因克隆载体主要有M13噬菌体和粘粒。


    正确答案:错误

  • 第3题：

    关于基因操作中目的基因的描述，错误的是（）。

    • A、研究的目标基因
    • B、需要研究其功能的基因
    • C、需要克隆的基因
    • D、需要表达的基因
    • E、有重要功能的基因

    正确答案:E

  • 第4题：

    以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或（），后者的形状呈（）。


    正确答案:质粒；小型环状(双链环状、环状)

  • 第5题：

    基因克隆主要分为以下几个步骤（）。

    • A、制备目的基因和相关载体
    • B、将目的基因和有关载体进行连接
    • C、将重组的DNA导入受体细胞
    • D、DNA重组体的筛选和鉴定
    • E、DNA重组体的扩增和表达

    正确答案:A,B,C,D,E

  • 第6题：

    常用的目的基因与载体的连接方法有哪些？


    正确答案: 外源DNA片段同载体分子连接的方法，即DNA分子体外重组技术，主要是依赖于核酸内切限制酶和DNA连接酶的作用.一般说来在选择外源DNA同载体分子连接反应程序时，需要考虑到下列三个因素：
    （1）实验步骤要尽可能地简单易行；
    （2）连接形成的"接点”序列，应能被一定的核酸内切限制酶重新切割，以便回收插入的外源DNA片段；
    （3）对转录和转译过程中密码结构的阅读不发生干扰。

  • 第7题：

    在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？


    正确答案:（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。
    （2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。
    （3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。
    （4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。
    （5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。

  • 第8题：

    连接目的基因与载体的方法有哪些？


    正确答案:亚克隆、黏性末端连接、平端连接、人工接头连接、同聚物加尾连接等。

  • 第9题：

    多选题
    可用作克隆基因载体的DNA有（　　）。
    A

    细菌质粒DNA

    B

    病毒DNA

    C

    噬菌体DNA

    D

    大肠杆菌基因组DNA


    正确答案： A,B
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    腺病毒基因治疗载体的特点有哪些？

    正确答案： 腺病毒是一种大分子（36kb）双链无包膜DNA病毒。它通过受体介导的内吞作用进入细胞内，然后腺病毒基因组转移至细胞核内，保持在染色体外，不整合进入宿主细胞基因组中。腺病毒载体的优点是基因导入效率高；宿主范围广；基因转导与细胞分裂无关；重组腺病毒可通过口服经肠道吸收、或喷雾吸入或气管内滴注；腺病毒载体容量较大，可插入7.5kb外源基因。其缺点是不能整合到靶细胞的基因组DNA中。治疗基因表达时间相对较短。宿主的免疫反应导致腺病毒载体表达短暂。部分环节可能产生复制型腺病毒。靶向性差。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？

    正确答案： （1）从基因组文库（genomic library）中获得；
    （2）从cDNA文库中获得；
    （3）PCR扩增特定基因；
    （4）人工合成。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    连接目的基因与载体的方法有哪些？

    正确答案： 亚克隆、黏性末端连接、平端连接、人工接头连接、同聚物加尾连接等。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    腺病毒基因治疗载体的特点有哪些？


    正确答案:腺病毒是一种大分子（36kb）双链无包膜DNA病毒。它通过受体介导的内吞作用进入细胞内，然后腺病毒基因组转移至细胞核内，保持在染色体外，不整合进入宿主细胞基因组中。腺病毒载体的优点是基因导入效率高；宿主范围广；基因转导与细胞分裂无关；重组腺病毒可通过口服经肠道吸收、或喷雾吸入或气管内滴注；腺病毒载体容量较大，可插入7.5kb外源基因。其缺点是不能整合到靶细胞的基因组DNA中。治疗基因表达时间相对较短。宿主的免疫反应导致腺病毒载体表达短暂。部分环节可能产生复制型腺病毒。靶向性差。

  • 第14题：

    基因克隆过程中，获得目的基因的途径有哪些？


    正确答案: （1）从基因组文库（genomic library）中获得；
    （2）从cDNA文库中获得；
    （3）PCR扩增特定基因；
    （4）人工合成。

  • 第15题：

    可用于克隆基因载体的DNA有（）。

    • A、细菌质粒DNA
    • B、噬菌体DNA
    • C、病毒DNA
    • D、酵母人工染色体
    • E、人基因组DNA

    正确答案:A,B,C,D

  • 第16题：

    分子克隆的载体必须具备目的基因的转录终止信号。


    正确答案:错误

  • 第17题：

    目的基因克隆的基本方法有哪些？


    正确答案: （1）直接从染色体DNA中分离：
    仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。
    （2）人工合成：
    根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。
    （3）从mRNA合成cDNA：
    采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。
    （4）利用PCR合成：
    如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应（polymerase chainreaction，PCR）技术，在体外合成目的基因。
    （5）从基因文库中筛选：
    首先建立基因组或cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。

  • 第18题：

    非病毒载体介导的真核细胞基因转移技术有哪些？


    正确答案: （1）脂质体介导的基因转移技术基本原理：利用阳离子脂质体单体与DNA混合后，可以自动形成包埋外源DNA的脂质体，然后与细胞一起孵育，即可通过细胞内吞作用将外源DNA（即目的基因）转移至细胞内，并进行表达。
    （2）受体介导转移技术将DNA与细胞或组织亲和性的配体偶联，可使DNA具有靶向性。
    （3）基因直接注射技术如：肌内注射凝血因子Ⅸ基因，可产生血友病所需的凝血因子Ⅸ。此外还有磷酸钙共沉淀，细胞核显微注射，基因枪颗粒轰击，多种物理化学等方法。

  • 第19题：

    基因工程中常用的载体的种类有（）

    • A、表达载体
    • B、质粒载体
    • C、克隆载体
    • D、转基因载体

    正确答案:A,C

  • 第20题：

    基因克隆的载体的概念及必须具备哪些性能？请列举三个基因载体。


    正确答案: 基因克隆的载体是把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具。必须具备的性能：
    ①本身是一个复制子，能自我复制，在受体细胞中大量繁殖；
    ②相对分子质量小；
    ③载体具有选择性的遗传标志，可供受体细胞辨认的表型特征；
    ④载体具有多个限制性内切酶的单一切点。
    三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。

  • 第21题：

    问答题
    痘病毒作为基因工程载体疫苗的载体的优点有哪些？

    正确答案： 痘病毒作为基因工程载体疫苗的载体的优点：
    （1）具有很好的安全性；
    （2）宿主细胞类型范围宽；
    （3）外源基因包装容量大；
    （4）在细胞质中复制、转录、翻译了RNA核加工、转移等的特殊要求；
    （5）外源基因表达高；
    （6）耐热性强，易获得高效价的培养。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    多选题
    基因工程中常用的载体的种类有（）
    A

    表达载体

    B

    质粒载体

    C

    克隆载体

    D

    转基因载体


    正确答案： C,A
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    腺相关病毒基因治疗载体的特点有哪些？

    正确答案： AAV是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5kb，无包膜。AAV不能独立复制，只有在辅助病毒存在时，才能进行复制和溶细胞性感染，否则只能建立溶源性潜伏感染。AAV的特点是以潜伏感染为主；高效定点整合至人染色体中，避免随机整合可能带来的抑癌基因失活和原癌基因激活的潜在危险性。AAV载体容量小，最多只能容纳5kb外源DNA片段。感染效率比逆转录病毒载体低。在40%-80%的成人中存在过感染，可能会引起免疫排斥。
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    问答题
    在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？

    正确答案： （1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。
    （2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。
    （3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。
    （4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。
    （5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。
    解析： 暂无解析

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