第3题:
鉴定包含体的存在部位、形状等特征,可作为病毒病临床诊断的辅助手段。
包含体特点:以包含体形式存在的蛋白质不具有正确的天然三维结构,表达蛋白不具有生物活性,因此在纯化过程中必须溶解包含体并对表达蛋白进行复性.包含体的形成成为基因工程下游处理的一大特点,也为重组蛋白质的生产提供了几点优势:包含体具有高密度,并且在水溶液中通常不容解,通过简单的离心就可以分离得到,可以容易地与胞内可溶性蛋白杂质分离,有利于表达产物的分离纯化;重组融合蛋白以包含体的形式表达有效地抵御了大肠杆菌中蛋白酶对表达蛋白的降解;对于生产那些处于天然构想时对宿主细胞有害的蛋白,包含体的形成无疑是最佳的选择,包含体在一定程度上改变了传统分离纯化蛋白质的方法.另外包含体中重组蛋白质产物经过了一个变性复性过程,非常容易形成蛋白质产物错误折叠和聚合体.包含体的分离及其中重组蛋白质的纯化步骤包括:细菌收集与破碎,包含体的分离、洗涤与溶解,变性蛋白质的纯化,重组蛋白质的复性,天然蛋白质的分离等。