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阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括A、有限稀释法B、无限稀释法C、显微操作法D、荧光激活细胞分选仪E、软琼脂平板法
题目
阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括
A、有限稀释法
B、无限稀释法
C、显微操作法
D、荧光激活细胞分选仪
E、软琼脂平板法
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第1题：
阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养A.单个
B.多个
C.双个
D.混合
E.没有数目限制答案：A解析：杂交瘤细胞形成后的初期尚不稳定，为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长的影响，必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养，产生单克隆杂交瘤细胞，经2-3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞，才能进行克隆化培养。 -
第2题：
关于阳性杂交瘤细胞的克隆化培养错误的说法是A.杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定
B.必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养
C.产生单克隆杂交瘤细胞，经1次检测为阳性，即可进行克隆化培养
D.阳性杂交瘤细胞应及时冻存
E.最好保存在-196℃液氮中答案：C解析：产生单克隆杂交瘤细胞，经2～3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞，才能进行克隆化培养。 -
第3题：
克隆化是获得单克隆杂交瘤细胞的关键，你知道哪些杂交瘤细胞克隆化的方法？选择一种详述其方法。
错 -
第4题：
阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括A.有限稀释法
B.无限稀释法
C.显微操作法
D.荧光激活细胞分选仪
E.软琼脂平板法答案：B解析：阳性杂交瘤细胞的克隆化（单个细胞培养）方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。 -
第5题：
2、克隆化是获得单克隆杂交瘤细胞的关键，你知道哪些杂交瘤细胞克隆化的方法？选择一种详述其方法。
利用B细胞产生特异性抗体的能力与骨髓瘤细胞的无限生长能力，将两者融合形成杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内可获得大量的高效价、单一的特异性抗体，该技术即单克隆抗体技术。杂交瘤细胞的获得方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合，采用HAT选择性培养基［培养基中加次黄嘌呤（H），氨基蝶呤A.及胸腺嘧啶核苷（T）］培养筛选。 在这种培养基中，由于变异的瘤细胞不具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷激酶，不能利用培养基中的次黄嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA，只能利用谷酰胺与尿核苷酸单磷酸合成DNA，这一途径又被氨基蝶呤所阻断，所以未融合的瘤细胞不可避免地死亡。融合的杂交瘤细胞由于脾淋巴细胞具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，可以通过次黄嘌呤合成DNA，克服氨基蝶呤的阻断，因此杂交瘤细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于2周内均死亡。