(1) 从供体生物的基因组中,分离获得带有目的基因的 DNA 片段; (2) 构建基因表达载体,通过限制性核酸内切酶分别将外源 DNA 和载体分子切开; (3) DNA 连接酶将含有外源基因的 DNA 片段连接到载体分子上,形成 DNA 重组分子; (4) 将重组 DNA 分子导入到受体细胞; (5) 带有重组体的细胞培养扩增,获得大量的细胞繁殖群体; (6) 筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞; (7) 将选出的细胞克隆的目的基因进一步研究分析,并设法使之实现功能蛋白的表达。